高效色谱仪定量分析的内标法是利用被测组分与内标物的的相对校正因子的比值不变进行定量的方法。

一、计算方法：

m_i/m_s =（f_i′A_i）/（f_s′A_s）

C_i% =（m_i/m）×100% =（f_i′A_im_s）/（f_s′A_sm）×100% =（f_i′/f_s′）×（A_i/A_s）×（m_s/m）×100%

式中：C_i%为被测组分i的百分含量。

A_i为被测组分i的峰面积。

A_s为内标物的峰面积。

f_i′为被测组分i的相对质量校正因子。

f_s′为内标物的相对质量校正因子。

m为被测样品的质量。

m_i为被测组分i的质量。

m_s为内标物的质量。

二、内标物应满足的要求：

1、内标物必须是被测样品中不存在的。

2、内标物不与被测样品发生化学反应，在所给定的色谱条件下具有一定的化学稳定性。

3、具有较高的纯度。

4、与被测样品有相近的浓度和类似的保留行为。

5、在接近被测样品的保留时间内洗脱下来。

6、内标物峰应与被测组分峰分开，并尽量接近被测组分峰。

7、内标物的校正因子应为已知的或者可测定。

三、具体做法：

准确称取样品，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析。根据样品和内标物的质量以及被测组分和内标物的峰面积的比值，求出被测组分的含量。

四、特点：

1、由于标准物质和被测样品处在同一基体中，可以消除基体带来的干扰，而且当仪器参数和洗脱条件发生非人为的变化时，标准物质和被测样品都会受到同样影响，这样消除了系统误差，定量结果较准确。

2、在样品中增加了内标物，常会对分离造成一定困难。

3、每次分析必须准确称量被测样品和内标物，不适合大批量样品的快速分析。

五、应用：

当样品各组分不能全部流出、有些组分在检测器上无信号或只需对样品中某几个出峰组分进行定量时，可采用内标法。

适合微量分析。

   

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