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高效凝胶色谱仪分析技术

(发布日期：2016-11-9 14:29:12) 来源：

高效凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用，是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。

一、工作原理：

小分子可以扩散到凝胶空隙中通过，出峰最慢。

中等分子只能通过部分凝胶空隙，中速通过。

大分子被排斥在外，出峰最快。

二、固定相：

1、半刚性凝胶：

为高交联度的聚苯乙烯，孔径范围较宽。

常以有机溶剂作流动相。

2、刚性凝胶：

为多孔硅胶。

可用水溶性溶剂和有机溶剂作流动相。

可在较高压强和较高流速下操作，但易拖尾。

三、流动相：

常用流动相有甲苯、苯、CH₂Cl₂、CHCl₃、CCl₄、四氢呋喃和水溶液等。

1、能溶解样品。

2、不应造成填料太大的溶胀和收缩。

3、控制pH和离子强度，可消除非排除机理的影响。

4、尽量降低溶剂粘度（加电介质）。

5、选择与样品折射率差别大的溶剂。

四、特点：

1、样品全部在溶剂的保留时间前洗脱。

2、色谱柱内的峰扩展较小。

3、.峰较窄，有利于检测。

4、.采用示差检测器。

五、不足：

1、峰容量小。

2、不能分离大小相似和分子量接近的样品。

六、应用：

适用于分子量不同的大分子样品（Mr＞2000）的分离。

来源：http://www.fudizao.com

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